分子实验室如何选择核酸提取仪？

云币网 2022年08月12日 09:16 77 Connor

随着分子生物学技术的快速发展，分子诊断和检测技术如核酸杂交、核酸扩增和核酸序列分析变得越来越重要。样品预处理占整个分析过程的60%，90%的检测误差发生在预处理环节。核酸的提取是分子诊断实验的“一步”，也是最关键的一步。获得的核酸质量直接影响下游分子生物学实验的成败。

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1.核酸提取原理

使用离心柱法的仪器

离心柱法核酸提取仪主要采用离心机与自动移液装置相结合的方法。通量一般为1-12个样本，操作时间与人工提取相差无几，无法提高实际工作效率。而且价格昂贵，不同类型的仪器耗材无法通用，只适合资金充足的大型实验室使用。

带有磁珠法的仪器

以磁珠为载体，利用磁珠在高盐低pH时吸附核酸而在低盐高PH时与核酸分离的原理，通过移动磁珠或转移液体的方式对核酸进行全过程提取纯化，由于其原理的独特性，可以设计成多种通量，单管提取或8-96个样品提取，操作简单快捷。一批提取时间为9-40min(不同厂家样品不同)，大大提高了实验效率，成本低。所以可以用在不同的实验室，是目前市场上的主流仪器。

磁珠法自动核酸提取仪分为磁棒法和吸引法。

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抽吸法

顾名思义，吸样是通过自动移液装置进行的。磁铁分为底部和侧面两种装置。抽吸法的问题是，为了在不去除磁珠的情况下去除废液，移液管不能离磁珠太近，以防磁珠随废液一起被去除。1)底部有磁铁的装置，由于磁珠被磁铁吸附在底部，使得漂洗液无法完全去除，残留的漂洗液中的盐和乙醇会影响后续的洗脱效率和PCR成功率；2)侧面有磁铁的装置会有较少的残液，但洗脱效率也不好。要靠DNA自己溶解到洗脱缓冲液中，除非超过半小时。所以有些96自动核酸抽取工作站抽取一发子弹需要150分钟，同样时间的32磁棒法可以抽取五发。

磁棒法核酸提取仪

通常，有8、16、32和96个通量通道。磁棒只是带走磁珠，转移到下一步对应的反应孔。此外，磁棒法的提取仪装置应具有更完善的功能，如加热，每个加热罐应独立控温，以便设置不同的加热、裂解和洗脱温度。还有一点很重要，驱动磁棒的电机要能驱动。

标签：核酸提取实验室分子选择